在使用液相色譜儀時為了延長泵的使用壽命和維持其輸液的穩定性,必須按照下列注意事項進行操作:
①防止任何固體微粒進入泵體,因為塵?;蚱渌魏坞s質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2/m或0.45/m)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
②流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內,尤其是在停泵長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內,由于蒸發或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
③泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,zui終產生漏液。
④輸液泵的工作壓力決不要超過規定的zui高壓力,否則會使高壓密封環變形,產生漏液。
⑤流動相應該先脫氣,以免在泵內產生氣泡,影響流量的穩定性,如果有大量氣泡,泵就無法正常工作。
如果輸液泵產生故障,須查明原因,采取相應措施排除故障:
①沒有流動相流出,又無壓力指示。原因可能是泵內有大量氣體,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損,需更換。
?、趬毫土髁坎环€。原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內超聲清洗。有時可能是砂濾棒內有氣泡,或被鹽的微細晶?;蜃躺奈⑸锊糠侄氯@時,可卸下砂濾棒浸入流動相內超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。
?、蹓毫^高的原因是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時應逐段進行。
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